Resumo. O colágeno extraído e purificado da pele da tilápia do Nilo (Oreochromis niloticus) é um valioso insumo que pode ser utilizado como biomaterial em aplicações mais sensíveis da medicina regenerativa, como cirurgias cardíacas e neurológicas. A avaliação toxicológica in vitro da linha celular L-929 é de suma importância, pois garante integridade e segurança nos diversos usos pretendidos, evitando reações adversas do organismo aos dispositivos derivados. Este trabalho teve como objetivo avaliar a toxicidade do colágeno purificado extraído da pele de tilápia utilizando a linha celular L-929. Houve uma diferença estatisticamente significativa entre o colágeno purificado e o controle negativo. O grupo experimental é atóxico e foi aprovado pela ISO 10993-5:2009, demonstrando crescimento celular acima de 70%. Alta proliferação celular (acima de 100%) também foi observada em estudos in vitro e in vivo com pele fresca de tilápia. Possivelmente possui mecanismos de sinalização na cascata do processo cicatricial, resultando em população celular acelerada. Espera-se que outros estudos biomoleculares e experimentos in vivo possam elucidar essa característica biológica única do colágeno da pele da tilápia no processo de viabilidade celular.